Nitric oxide regulates adhesiveness, invasiveness, and migration of anoikis-resistant endothelial cells

Anoikis is a type of apoptosis that occurs in response to the loss of adhesion to the extracellular matrix (ECM). Anoikis resistance is a critical mechanism in cancer and contributes to tumor metastasis. Nitric oxide (NO) is frequently upregulated in the tumor area and is considered an important player in cancer metastasis. The aim of this study was to evaluate the effect of NO on adhesiveness, invasiveness, and migration of anoikis-resistant endothelial cells. Here, we report that anoikis-resistant endothelial cells overexpress endothelial nitric oxide synthase. The inhibition of NO release in anoikis-resistant endothelial cells was able to decrease adhesiveness to fibronectin, laminin, and collagen IV. This was accompanied by an increase in cell invasiveness and migration. Furthermore, anoikis-resistant cell lines displayed a decrease in fibronectin and collagen IV protein expression after L-NAME treatment. These alterations in adhesiveness and invasiveness were the consequence of MMP-2 up-regulation observed after NO release inhibition. The decrease in NO levels was able to down-regulate the activating transcription factor 3 (ATF3) protein expression. ATF3 represses MMP-2 gene expression by antagonizing p53-dependent trans-activation of the MMP-2 promoter. We speculate that the increased release of NO by anoikis-resistant endothelial cells acted as a response to restrict the MMP-2 action, interfering in MMP-2 gene expression via ATF3 regulation. The up-regulation of nitric oxide by anoikis-resistant endothelial cells is an important response to restrict tumorigenic behavior. Without this mechanism, invasiveness and migration potential would be even higher, as shown after L-NAME treatment.

Double plating technique for fixing tibial plateau leveling osteotomy and modified cranial closing wedge ostectomy of the tibia in a dog with cranial cruciate ligament disease and excessive plateau angle: case report / [Técnica de placa dupla para fixação concomitante da osteotomia de nivelamento do platô tibial e ostectomia modificada em cunha de fechamento cranial da tíbia em um cão com doença do ligamento cruzado cranial e ângulo de platô tibial excessivo: relato de caso]

Tibial plateau leveling osteotomy (TPLO) associated to cranial wedge closing ostectomy (CCWO) has been one of the best options to manage cranial cruciate ligament (CCL) disease and excessive tibial plateau angle (TPA) in large dogs, however, the complication rate is potentially high. It is believed that a more robust fixation is necessary to stabilize them and decrease the risk of implant failure. A 6-year-old male American Pit Bull, weighing 36kg, with 90-day history of right hind limb lameness, was diagnosed with CCL disease. Due to the excessive tibial plateau angle (42°), TPLO was associated with a modified CCWO using a double plating technique. A final TPA of 12° was accomplished, and a restricted level of exercises and physiotherapy were recommended. The patient was followed monthly until the fifth month postoperatively, when radiographic bone consolidation and no lameness were observed. By the date of this submission, 3 years after the procedure, the owner has reported no complications. The double plating technique for fixing TPLO and modified CCWO proved to be effective for the treatment of CrCL deficiency in a large dog with an excessive TPA.(AU)

A osteotomia de nivelamento do platô tibial (TPLO) associada à ostectomia modificada em cunha de fechamento cranial da tíbia (CCWO) tem sido uma das melhores opções para tratamento de cães grandes com doença do ligamento cruzado cranial (DLCCr) e ângulo excessivo do platô tibial, mas o índice de complicações é alto. Acredita-se haver necessidade de fixação mais robusta para reduzir as chances de falha nos implantes. Um cão macho, seis anos, da raça American Pit Bull, 36kg, com histórico de claudicação em membro pélvico direito há 90 dias, foi diagnosticado com DLCCr. Devido ao ângulo excessivo do platô tibial (42°), a osteotomia de nivelamento do platô tibial foi associada à ostectomia modificada em cunha de fechamento cranial da tíbia (CCWO) por meio da técnica de placa dupla. No pós-operatório imediato, identificou-se TPA de 12°; exercícios controlados e fisioterapia foram recomendados e a evolução do quadro foi analisada mensalmente até o quinto mês pós-cirurgia. Com 150 dias de evolução, não houve alterações de locomoção e havia ocorrido completa consolidação radiográfica das osteotomias. Até o momento da submissão deste artigo, três anos pós-procedimento, o tutor relata ausência de complicações, via contato telefônico. Portanto, a técnica modificada mostrou-se eficaz no tratamento da DLCCr.(AU)

Melanoma oral amelanótico metastático com acometimento neurológico e gonadal em um cão fêmea - relato de caso / [Metastatic oral amelanotic melanoma with neurologic and gonadal involvement in a female dog - case report]

Relata-se um caso de melanoma oral disseminado em uma cadela de dois anos, com protrusão de bulbo ocular unilateral e quadro convulsivo progressivo. Os exames de imagem revelaram aumento de volume nas regiões submandibular, maxilar e cerebral, padrão nodular pulmonar e aumento das dimensões ovarianas. A citologia da massa submandibular indicou proliferação epitelial maligna, enquanto a biópsia excisional foi sugestiva de melanoma amelanótico. Na necropsia, havia uma massa gengival localmente infiltrativa e nodulações brancas nos linfonodos, nos rins, no pulmão, no cérebro e nos ovários, indicativas de metástase. O diagnóstico histopatológico consistiu de neoplasia maligna metastática indiferenciada, indicativo de melanoma amelanótico. Células caracterizadas por núcleo com cromatina espessa, múltiplos nucléolos bem evidentes, mitoses atípicas e multinucleações consistiram nos principais critérios de malignidade. No espaço peritrabecular ósseo facial, havia rara diferenciação pigmentar melanocítica, confirmada histoquimicamente pela técnica de Fontana-Massom e Giemsa. Algumas células foram positivas pela imuno-histoquímica para PNL-2 e Melan-A, e o diagnóstico de melanoma amelanótico disseminado foi firmado. A indiferenciação neoplásica marcante, com disseminação metastática multissistêmica e acometimento mútuo de sítios anatômicos pouco comuns, conjuntamente com a ampla variação dos padrões celulares, foi responsável pelo desafio diagnóstico do presente caso, ressaltando o papel decisivo da imuno-histoquímica para confirmação diagnóstica. A importância clínica deste trabalho consiste ainda em alertar a comunidade clínica e científica acerca da dificuldade diagnóstica, devendo-se considerar o melanoma amelanótico como diferencial mesmo em casos de lesões orais menos perceptíveis e/ou desprovidas de pigmentação.(AU)

A case of disseminated oral melanoma in a two year old female dog with unilateral protuberance of the eye bulb and progressive seizure is described. Imaging exams revealed increase of the submandibular, maxillary and cerebral regions, nodular pattern in lungs and increased ovarian dimensions. The cytology of the submandibular mass indicated a malignant epithelial proliferation, whereas the excisional biopsy indicated an amelanotic melanoma. At necropsy, a locally infiltrating gingival mass and white nodules in the lymph nodes, kidneys, lung, brain and ovaries were observed, indicative of metastases. Histopathological diagnosis consisted of an undifferentiated malignant metastatic neoplasm. Nucleus with coarse chromatin, prominent nucleoli, bizarre mitotic figures and multinucleated cells were the major malignant features. There was a poor melanocytic pigment differentiation in the peritrabecular space of facial bones, confirmed by Fontana-Masson and Giemsa histochemical techniques. Only a few cells were immunohistochemically positive for PNL-2 and Melan-A and the diagnosis of a disseminated amelanotic melanoma was performed. The diagnostic challenge was based on marked neoplastic undifferentiation, with multisystemic metastasis and mutual involvement of uncommon anatomic sites, associated with a large variability of cellular patterns, highlighting the decisive role of immunohistochemistry for diagnostic confirmation. Therefore, the clinical importance of this study is to warn the clinical and scientific community about the diagnostic challenge, considering the amelanotic melanoma as a differential even in cases of poorly apparent and/or nonpigmented oral lesions.(AU)

Amifostine reduces inflammation and protects against 5-fluorouracil-induced oral mucositis and hyposalivation

Oral mucositis (OM) is a common and dose-limiting side effect of cancer treatment, including 5-fluorouracil (5-FU) and radiotherapy. The efficacy of the therapeutic measures to prevent OM is limited and disease prevention is not fully observable. Amifostine is a cytoprotective agent with a described anti-inflammatory potential. It is clinically used to reduce radiotherapy and chemotherapy-associated xerostomia. This study investigated the protective effect of amifostine on an experimental model of OM. Hamsters were divided into six groups: saline control group (5 mL/kg), mechanical trauma (scratches) of the right cheek pouch; 5-FU (60 and 40 mg/kg, ip, respectively, administered on days 1 and 2); amifostine (12.5, 25, or 50 mg/kg) + 5-FU + scratches. Salivation rate was assessed and the animals were euthanized on day 10 for the analysis of macroscopic and microscopic injury by scores. Tissue samples were harvested for the measurement of neutrophil infiltration and detection of inflammatory markers by ELISA and immunohistochemistry. 5-FU induced pronounced hyposalivation, which was prevented by amifostine (P<0.05). In addition, 5-FU injection caused pronounced tissue injury accompanied by increased neutrophil accumulation, tumor necrosis factor-alpha (TNF-α), and interleukin-1 beta (IL-1β) tissue levels, and positive immunostaining for TNF-α, IL-1β, and inducible nitric oxide synthase (iNOS). Interestingly, amifostine prevented the inflammatory reaction and consequently improved macroscopic and microscopic damage (P<0.05 vs 5-FU group). Amifostine reduced inflammation and protected against 5-FU-associated oral mucositis and hyposalivation.

Reproductive dynamics of Lycengraulis grossidens (Clupeiformes: Engraulidae) and Platanichthys platana (Clupeiformes: Clupeidae) in a subtropical coastal lagoon / Dinâmica reprodutiva de Lycengraulis grossidens (Clupeiformes: Engraulidae) e Platanichthys platana (Clupeiformes: Clupeidae) em uma lagoa costeira subtropical

Abstract We evaluated the reproductive dynamics of two fish species, Lycengraulis grossidens and Platanichthys platana, in a subtropical freshwater coastal lagoon (Peri Lagoon) in Brazil. Samples were collected from nine sites every two months from June 2008 to April 2012. Different fishing methods were used to capture larvae, juveniles, and adults. Limnological variables were obtained using multiparameter probe. More females than males were collected of both fish species and the chi-square test (χ2) was used to confirm that the sex ratio was female-biased. Large numbers of maturing and mature fishes were observed in almost every sampling month. The gonadosomatic index (GSI) of L. grossidens was the highest in August, October, and December for females and in October for males, and no significant difference was found across years. The GSI of P. platana showed no significant difference across months for either sex; however, significant differences were recorded in year three (June 2010-April 2011) and year four (June 2011-April 2012) for females and in year three (June 2010-April 2011) for males. For both species, GSI was negatively correlated with temperature and water level. L. grossidens larvae were more abundant in October 2010, showing a positive correlation with water transparency, whereas P. platana larvae were more abundant in June 2011, showing a positive correlation with water transparency and negative correlation with temperature and precipitation. Both species were represented by different stages, including larvae, which confirm that these species reproduce in Peri Lagoon. Reproduction was more pronounced in autumn and winter; however, reproductive activity was evident throughout the sampling period. In conclusion, our results show that abiotic factors strongly influence the temporal pattern of reproductive activity and larval assemblages of both L. grossidens and P. platana in Peri Lagoon, Brazil.

Resumo O objetivo do estudo foi avaliar a dinâmica reprodutiva de Lycengraulis grossidens e Platanichthys platana, na lagoa do Peri, uma lagoa costeira de água doce subtropical do Brasil. As amostras foram coletadas a cada dois meses, de junho/2008 a abril/2012 em nove pontos de amostragem. Para a captura de larvas, juvenis e adultos foram utilizados diferentes apetrechos de pesca. As variáveis limnológicas foram obtidas com sonda multiparâmetro. Estatisticamente, mais fêmeas do que machos foram capturadas para as duas espécies baseado no teste de qui-quadrado (χ2). Grande número de peixes em maturação e maduros foram comuns em quase todos os meses de coleta. O índice gonadossomático (RGS) de L. grossidens variou significativamente apenas entre os meses, sendo mais elevada em agosto, outubro e dezembro para as fêmeas e em outubro para os machos; e não foram encontradas diferenças significativas entre os anos. Não foi encontrado diferença significativa para o RGS de P. platana entre os meses para cada sexo; entretanto, diferenças significativas foram obtidas para as fêmeas no ano três (junho 2010-abril 2011) e quatro (junho 2011-abril 2012) e no ano três (junho 2010-abril 2011) para os machos. Para as duas espécies, o RGS apresentou uma correlação negativa com a temperatura e o nível de água. A distribuição das larvas apresentou variação temporal. As larvas de L. grossidens foram mais abundantes em outubro/2010, apresentando correlação positiva com a transparência da água. As larvas da espécie P. platana foram mais abundantes em junho/2011, apresentando correlação positiva com a transparência da água e negativa com a temperatura e a precipitação. A presença de L. grossidens e P. platana em diferentes estádios de maturação e a ocorrência de larvas confirmou que essas espécies se reproduzem na lagoa do Peri. O período reprodutivo foi mais pronunciado no outono e no inverno, porém a atividade reprodutiva ocorreu durante todo o período de coleta. Em conclusão, nossos resultados mostraram que os fatores abióticos influenciam fortemente o padrão temporal da atividade reprodutiva e a assembleia de larvas da L. grossidens e da P. platana na lagoa do Peri, Brasil.

Caracterização nutricional das folhas de Moringa oleifera (MOL) para frangos de corte / Chemical and nutritional characterization of moringa oleifera leaves for broilers

Objetivou-se determinar os valores energéticos e nutricionais das folhas de Moringa oleifera (MOL) para frangos de corte. Utilizaram-se 90 pintos machos, Cobb-500, com 14 dias de idade, distribuídos em delineamento inteiramente ao acaso, com cinco tratamentos e seis repetições de três aves. Os tratamentos consistiram de: uma dieta referência e quatro dietas com substituição de 10%, 20%, 30% e 40% da dieta referência pelas folhas de MOL. O período experimental teve duração de oito dias, utilizando-se a metodologia de coleta total de excretas. Foram determinados os valores de energia metabolizável aparente (EMA), aparente corrigida para o nitrogênio (EMAn), coeficiente de metabolizabilidade aparente da matéria seca (CMAMS), da proteína bruta (CMAPB) e da energia bruta (CMAEB). Os resultados obtidos foram submetidos à análise de variância e à análise de regressão a 5% de probabilidade. Houve efeito quadrático das variáveis à medida que a moringa era adicionada à ração referência. Na derivação das equações de regressão, o nível que proporcionou os melhores valores de EMA, EMAn e CMEB foi de 37,7% de substituição. O farelo de folhas MOL apresentou médias de 3140kcal/kg de EMA, 2845kcal/kg de EMAn, 76,92% de CMAEB, 76,63% de CMAMS e 73,42% de CMAPB.(AU)

This study aimed to determine the energy and nutritional value of the leaves of Moringa oleifera (MOL) for broilers. We used 90 male chicks, Cobb-500, with 14 days of age in a completely randomized design with five treatments and six repetitions of three birds. The treatments were: reference diet and 4 diets with substitution of 10%, 20%, 30%, and 40% of the diet by reference sheet MOL. The trial lasted eight days, using the method of total excreta collection. The apparent metabolizable energy (AME), apparent corrected for nitrogen (AMEn), apparent metabolizable coefficient of dry matter (AMCDM), crude protein (AMCCP) and gross energy (AMCGE). The results were submitted to analysis of variance and regression analysis at 5% probability. There was a quadratic effect of the variables as the moringa was added to the reference diet. In the derivation of the regression equations the level that provided the best values of AME, AMEn, AMCGE was 37.7% substitution. The leaves meal MOL presented average 3140kcal / kg of AME, 2845kcal / kg AMEn, 76.92% of AMCGE, 76.63% of AMCDM and 73.42% of AMCCP.(AU)

Massa de forragem, composição morfológica e valor nutritivo de capim-braquiária submetido a níveis de sombreamento e fertilização / Herbage mass, morphological composition and nutritive value of signalgrass, submitted to shading and fertilization levels

Características produtivas e nutricionais de Brachiaria decumbens, submetida a condições de sombreamento (sol pleno, 20% e 70% de sombreamento), sem e com uso de fertilização (80 kg.ha-1 de N e K2O e 60 kg.ha-1 de P2O5), foram avaliadas no delineamento de blocos casualizados, com quatro repetições. As parcelas sombreadas foram alocadas em um sistema silvipastoril, enquanto aquelas a pleno sol foram avaliadas em um monocultivo de B. decumbens. O sombreamento severo promoveu reduções de 54% na massa seca verde, 59% na massa seca total e 58% na densidade volumétrica de forragem. Aumentos da massa de forragem e da densidade volumétrica em resposta ao fertilizante foram observados somente nas condições de sol pleno e sombreamento moderado. A adubação não influenciou nas características nutricionais da forragem, mas o sombreamento severo promoveu aumentos de 20 e 51% nos teores de clorofila e de proteína bruta, respectivamente. Reduções dos teores de fibra em detergente neutro e fibra em detergente ácido foram observadas com o sombreamento. Os teores de lignina e a digestibilidade in vitro da matéria seca não variaram com nenhum fator estudado (médias de 6,0 e 60,9%, respectivamente). A adubação de B. decumbens com dose moderada de NPK é recomendada para dosséis cultivados no sol pleno e sombreamento moderado, mas deve ser evitada em pastos severamente sombreados, pois não reflete aumento de massa de forragem nem melhorias de seu valor nutricional.(AU)

Productive and nutritional traits of Brachiaria decumbens, submitted to shading conditions (full sun, 20% and 70% shading) and fertilization levels (without or with 80 kg.ha-1 of N and K 2 O and 60 kg.ha-1 of P 2O5), were evaluated in a randomized complete block design, with four replications. The shading were allocated in a silvopastoral system, while full sun was obtained in an exclusive B. decumbens pasture. The severe shading reduced the green dry mass in 54%, total dry mass in 59% and the forage bulk density in 58%. Increases in the forage mass and forage bulk density in response to fertilization were observed only in full sun and moderate shade. The nutritional traits did not vary with fertilization, but the chlorophyll and crude protein contents increased 20 and 51% with severe shading, respectively. The neutral detergent fiber and acid detergent fiber reduced with shade. The lignin content and in vitro dry matter digestibility did not vary with factors (average values of 6.0 and 60.9%, respectively). Fertilization with moderate dose of NPK is recommended to B. decumbens in full sun and moderate shading, but should be avoided in severely shaded pasture, because not reflected in improvement of forage mass and its nutritional traits.(AU)

Reproductive dynamics of Lycengraulis grossidens (Clupeiformes: Engraulidae) and Platanichthys platana (Clupeiformes: Clupeidae) in a subtropical coastal lagoon

Abstract We evaluated the reproductive dynamics of two fish species, Lycengraulis grossidens and Platanichthys platana, in a subtropical freshwater coastal lagoon (Peri Lagoon) in Brazil. Samples were collected from nine sites every two months from June 2008 to April 2012. Different fishing methods were used to capture larvae, juveniles, and adults. Limnological variables were obtained using multiparameter probe. More females than males were collected of both fish species and the chi-square test (2) was used to confirm that the sex ratio was female-biased. Large numbers of maturing and mature fishes were observed in almost every sampling month. The gonadosomatic index (GSI) of L. grossidens was the highest in August, October, and December for females and in October for males, and no significant difference was found across years. The GSI of P. platana showed no significant difference across months for either sex; however, significant differences were recorded in year three (June 2010-April 2011) and year four (June 2011-April 2012) for females and in year three (June 2010-April 2011) for males. For both species, GSI was negatively correlated with temperature and water level. L. grossidens larvae were more abundant in October 2010, showing a positive correlation with water transparency, whereas P. platana larvae were more abundant in June 2011, showing a positive correlation with water transparency and negative correlation with temperature and precipitation. Both species were represented by different stages, including larvae, which confirm that these species reproduce in Peri Lagoon. Reproduction was more pronounced in autumn and winter; however, reproductive activity was evident throughout the sampling period. In conclusion, our results show that abiotic factors strongly influence the temporal pattern of reproductive activity and larval assemblages of both L. grossidens and P. platana in Peri Lagoon, Brazil.

Resumo O objetivo do estudo foi avaliar a dinâmica reprodutiva de Lycengraulis grossidens e Platanichthys platana, na lagoa do Peri, uma lagoa costeira de água doce subtropical do Brasil. As amostras foram coletadas a cada dois meses, de junho/2008 a abril/2012 em nove pontos de amostragem. Para a captura de larvas, juvenis e adultos foram utilizados diferentes apetrechos de pesca. As variáveis limnológicas foram obtidas com sonda multiparâmetro. Estatisticamente, mais fêmeas do que machos foram capturadas para as duas espécies baseado no teste de qui-quadrado (2). Grande número de peixes em maturação e maduros foram comuns em quase todos os meses de coleta. O índice gonadossomático (RGS) de L. grossidens variou significativamente apenas entre os meses, sendo mais elevada em agosto, outubro e dezembro para as fêmeas e em outubro para os machos; e não foram encontradas diferenças significativas entre os anos. Não foi encontrado diferença significativa para o RGS de P. platana entre os meses para cada sexo; entretanto, diferenças significativas foram obtidas para as fêmeas no ano três (junho 2010-abril 2011) e quatro (junho 2011-abril 2012) e no ano três (junho 2010-abril 2011) para os machos. Para as duas espécies, o RGS apresentou uma correlação negativa com a temperatura e o nível de água. A distribuição das larvas apresentou variação temporal. As larvas de L. grossidens foram mais abundantes em outubro/2010, apresentando correlação positiva com a transparência da água. As larvas da espécie P. platana foram mais abundantes em junho/2011, apresentando correlação positiva com a transparência da água e negativa com a temperatura e a precipitação. A presença de L. grossidens e P. platana em diferentes estádios de maturação e a ocorrência de larvas confirmou que essas espécies se reproduzem na lagoa do Peri. O período reprodutivo foi mais pronunciado no outono e no inverno, porém a atividade reprodutiva ocorreu durante todo o período de coleta. Em conclusão, nossos resultados mostraram que os fatores abióticos influenciam fortemente o padrão temporal da atividade reprodutiva e a assembleia de larvas da L. grossidens e da P. platana na lagoa do Peri, Brasil.

Energia metabolizável da levedura de cana-de-açúcar submetida a diferentes temperaturas e tempos de secagem para frangos de corte e poedeiras / Metabolizable energy of sugar cane yeast submitted to different temperatures and drying times for broilers and layers hens

Objetivou-se determinar a temperatura e o tempo de secagem por rolos rotativos, aos quais a, levedura de cana-de-açúcar é submetida que permitam seu melhor aproveitamento energético por galinhas poedeiras e frangos de corte. Para isso foram realizados três ensaios de metabolismo para determinar os valores de energia metabolizável aparente (EMA), aparente corrigida para nitrogênio (EMAn) e os coeficientes de metabolizabilidade aparente da matéria seca (CMMS) e da energia bruta (CMEB). O primeiro ensaio foi conduzido com galinhas poedeiras (E1), o segundo com frangos de corte (E2) em crescimento e o terceiro com frangos de corte em diferentes idades (E3)...

This study aimed to determine the temperature and drying time through rotative rolls, that sugar cane yeast is subjected to in order to allow best energy utilization by laying hens and broilers. Three metabolism trials were conducted to determine the values of apparent metabolizable energy (AME) and apparent corrected for nitrogen balance (AMEn), coefficient of apparent metabolizable dry matter (CAMDM) and gross energy (CAMGE). The first experiment was conducted with laying hens (E1), the second with broilers (E2) in growth and the third with broilers at different ages (E3)...

Espinheira-santa (Maytenus ilicifolia Mart. ex Reiss.): saber de erveiros e feirantes em Pelotas (RS) / Espinheira-santa (Maytenus ilicifolia Mart. ex Reiss.): knowledge by herbalists and marketers in Pelotas (RS)

RESUMO O objetivo deste trabalho é descrever o conhecimento popular relacionado à espinheira-santa (Maytenus ilicifolia) entre erveiros e feirantes que comercializam a planta no centro de Pelotas, Rio Grande do Sul, Brasil. Foi realizada uma pesquisa de abordagem qualitativa, exploratória e descritiva, de agosto a outubro de 2013. Entrevistas semi-estruturadas, com questões sobre os saberes e práticas relacionados à espinheira-santa, foram aplicadas a cinco erveiros e três feirantes do mercado informal de plantas medicinais. Para a análise dos dados foi utilizada a proposta operativa de Minayo, sendo Capra o referencial teórico para este estudo. Foi verificado que o saber relacionado ao uso da espinheira-santa é transmitido de geração a geração, embora existam outras fontes de conhecimento. As indicações do uso popular da espinheira-santa com finalidade terapêutica estão relacionadas a distúrbios gástricos, cicatrização e depuração do sangue. As diferentes formas dos sujeitos deste estudo interagirem com o ambiente, com sua família e em outras relações interpessoais resultam em diferentes saberes relacionados à espinheira-santa.

ABSTRACT The aim of this study was to describe the popular knowledge related to the espinheira-santa (Maytenus ilicifolia) among herbalists and marketers that sell this plant in the center of Pelotas/Rio Grande do Sul State, Brazil. A qualitative, exploratory and descriptive research was performed between August and July of 2013. Semi-structured interviews, with questions regarding the knowledge and practices related to this plant, were applied to five herbalists and three marketers inserted in the informal market of medicinal plants. The operative proposal by Minayo was used in order to analyze the data, and the theoretical framework by Capra was used in the discussion. The popular knowledge related to the use of espinheira-santa is passed on from generation to generation, although nowadays there are other sources ofinformation. The popular clueswith therapeutic purposes are related to gastric disorders, healing and blood clearance. The study participants have different forms of interaction with the environment, the family and other interpersonal relationships, resulting in different popular knowledges related to this medicinal plant.

Transforming growth factor-β (TGF-β) maintains follicular ultrastructure and stimulates preantral follicle growth in caprine ovarian tissue cultured in vitro / Fator de crescimento transformante-β (TGF-β) mantém a ultraestrutura folicular e estimula o crescimento de folículos pré-antrais caprinos inclusos em tecido ovariano cultivado in vitro

The objectives of this study were to investigate whether TGF-β affect the survival, activation and further growth of goat primordial follicles enclosed in ovarian cortex after in vitro culture. Goat ovaries were collected from an abattoir and pieces of ovarian tissues were cultured for one or seven days in a supplemented alpha Minimum Essential Medium, alone or containing TGF-β (1, 5, 10 or 50ng/mL). Ovarian tissues from the fresh control as well as those cultured were processed for histological and ultrastructural studies. The results showed that when compared with fresh control, there was decrease in the percentages of histologically normal follicles in all treatments only after seven days culture. TGF-β did not affect the activation of preantral follicles regardless of its concentration, however, larger follicles diameter (P<0.05) was observed using 10ng/mL TGF-β than in the fresh control and other treatments. Moreover, this concentration maintained the normal ultrastructure after seven days of culture. In conclusion, TGF-β showed additional effect on the follicle growth and the maintenance of ultrastructural integrity of goat preantral follicles enclosed in ovarian tissue when used at 10ng/mL during seven days of culture...

O objetivo desse estudo foi investigar se o TGF-β afeta a sobrevivência, ativação e crescimento de folículos primordiais caprinos inclusos no córtex ovariano após o cultivo in vitro. Ovários de cabras foram coletados em abatedouro e fragmentos de tecido ovariano foram cultivados por um e sete dias em meio essencial mínimo alfa (α-MEM+) sozinho ou suplementado com TGF-β (1, 5, 10 ou 50ng/mL). Fragmentos ovarianos não cultivados e cultivados foram processados para análise histológica e ultraestrutural. Os resultados mostraram que, comparado ao controle fresco, houve diminuição no percentual de folículos morfologicamente normais em todos os tratamentos somente após sete dias de cultivo. O TGF-β não afetou a ativação folicular independente da concentração testada, contudo, o diâmetro folicular foi superior (P<0.05) no tratamento com 10ng/mL de TGF-β quando comparado ao controle fresco e aos demais tratamentos. Além disso, essa mesma concentração manteve a ultraestrutura normal dos folículos após sete dias de cultivo. Em conclusão, o TGF-β apresentou efeito adicional no crescimento folicular e na manutenção da integridade ultraestrutural de folículos pré-antrais caprinos inclusos no tecido ovariano quando utilizado na concentração de 10ng/mL durante sete dias de cultivo...

Padronização da técnica de plasmaférese automatizada em equinos / Standardization of automated plasmapheresis in horses

O presente artigo objetivou estudar a viabilidade da técnica de plasmaférese automatizada e padronizá-la em cinco equinos hígidos, bem como apresentar as complicações durante o procedimento, as adequações em relação aos procedimentos em humanos e avaliar a recuperação de volume globular e proteínas plasmáticas totais nos doadores. Os procedimentos foram realizados com o equipamento Fresenius AS104, com duração média de 1h46min, processamento de 5758mL de sangue total e colheita média de 3133mL de plasma. Não foram observadas alterações significativas do volume globular após a plasmaférese automatizada. A recuperação dos níveis plasmáticos de proteínas foi de 91,4% em 96 horas após o procedimento. A plasmaférese automatizada apresentou-se viável para a espécie equina, diminuindo o tempo de recuperação hematimétrica nos doadores.

This paper aimed to study feasibility and standardize the automated plasmapheresis in five healthy horses, showing the complications during the procedure, adjustments in relation to the procedures in humans and assessing the recovery of globular volume and plasma total proteins in donors. The procedures were performed with the Fresenius AS104 equipment, with an average duration of one hour and forty six minutes, processing 5758mL of whole blood and harvest average of 3133mL of plasma. There were no significant variations in globular volume after the automated plasmapheresis. The recovery of plasma total proteins was 91.4% at 96 hours after the procedure. The automated plasmapheresis appeared viable for the equine species, decreasing the time of hematimetric level recovery in donors.

Risk factors associated with Toxoplasma gondii infection in dairy cattle, state of Rio de Janeiro / Fatores de risco associados à infecção por Toxoplasma gondii em bovinos leiteiros no estado do Rio de Janeiro

Toxoplasmosis is one of the most common parasitic zoonoses throughout the world. Infection in man and animals varies in different geographical areas influenced by many environmental conditions. Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in cattle in Brazil ranges from 1.03 to 71 percent. A cross-sectional survey was carried out in 58 out of 453 farms in the South Fluminense Paraiba Valley, State of Rio de Janeiro, Brazil. Over 3-year-old cattle (n=589) from dairy herds were selected for blood collection and detection of anti-T. gondii antibodies by indirect immunofluorescence reaction (IFA) with initial titration of 1:16; titers > 64 were considered positive. Univariate analysis of risk factors showed that cats in contact with cattle, cats in contact with drinking water, and number of cats were associated with T. gondii seroprevalence. Logistic regression revealed a two-fold increased risk for infection of cattle (p=0.0138) through larger number of cats (>3) compared with low numbers of cats (1-2) on the farm. In contrast, the presence of chickens was considered a protective factor (p=0.025).

Toxoplasmose é uma das mais comuns zoonoses parasitárias do mundo. Infecções em seres humanos e em animais variam nas diferentes áreas geográficas influenciadas pelas condições ambientais. A soroprevalência da infecção por Toxoplasma gondii em bovinos no Brasil varia de 1,03 a 71,0 por cento. O estudo transversal foi realizado em 58 de um total de 453 propriedades na região Sul Fluminense do estado do Rio de Janeiro. Vacas leiteiras acima de 3 anos de idade (n=589) foram selecionadas para coleta de sangue e a detecção de anticorpos anti-T. gondii foi feita pelo teste de imunofluorescência indireta (IFI) com titulação inicial de 1:16 e títulos > 64 foram considerados positivos. Após análise univariada dos fatores de risco, gatos em contato com bovinos, em contato com a água de beber dos animais e o número de gatos foram associados com a soroprevalência de T. gondii. A regressão logística demonstrou que o número maior de gatos (>3) teve um risco duas vezes maior (p=0,0138) que propriedades que tinham um número menor de gatos (1-2). Em contraste, a presença de galinhas foi considerada um fator de proteção (p=0,025).

Optimization of killer assays for yeast selection protocols / Optimización de la actividad killer para protocolos de selección de levaduras

A new optimized semiquantitative yeast killer assay is reported for the first time. The killer activity of 36 yeast isolates belonging to three species, namely, Metschnikowia pulcherrima, Wickerhamomyces anomala and Torulaspora delbrueckii, was tested with a view to potentially using these yeasts as biocontrol agents against the wine spoilage species Pichia guilliermondii and Pichia membranifaciens. The effectiveness of the classical streak-based (qualitative method) and the new semiquantitative techniques was compared. The percentage of yeasts showing killer activity was found to be higher by the semiquantitative technique (60%) than by the qualitative method (45%). In all cases, the addition of 1% NaCl into the medium allowed a better observation of the killer phenomenon. Important differences were observed in the killer capacity of different isolates belonging to a same killer species. The broadest spectrum of action was detected in isolates of W. anomala NPCC 1023 and 1025, and M. pulcherrima NPCC 1009 and 1013. We also brought experimental evidence supporting the importance of the adequate selection of the sensitive isolate to be used in killer evaluation. The new semiquantitative method proposed in this work enables to visualize the relationship between the number of yeasts tested and the growth of the inhibition halo (specific productivity). Hence, this experimental approach could become an interesting tool to be taken into account for killer yeast selection protocols.

En este trabajo se presenta un nuevo ensayo semicuantitativo que optimiza la detección de actividad killer en levaduras. Se evaluó la actividad killer de 36 cepas pertenecientes a las especies Metschnikowia pulcherrima, Wickerhamomyces anomala y Torulaspora delbrueckii, en vista del potencial uso de estas levaduras como agentes de biocontrol frente a las especies contaminantes de vinos Pichia guilliermondii y Pichia membranifaciens. Se comparó la efectividad de la técnica clásica basada en estrías (método cualitativo) con la del nuevo método semicuantitativo. El porcentaje de levaduras que mostraron actividad killer fue más alto cuando se utilizó el método semicuantitativo (60%) que con el método cualitativo (45%). En todos los casos, el agregado de 1% de NaCl en el medio permitió una mejor observación del fenómeno killer. Se observaron importantes diferencias en la capacidad killer de diferentes cepas dentro de la misma especie. Se detectaron dos cepas de W. anomala (NPCC 1023 y 1025) y dos cepas de M. pulcherrima (NPCC 1009 y 1013) con un amplio espectro de acción, ya que fueron capaces de inhibir el desarrollo de las tres levaduras sensibles evaluadas. La evidencia experimental demuestra la importancia de una adecuada selección de la cepa sensible al evaluar la actividad killer. El nuevo método semicuantitativo propuesto en este trabajo permite visualizar la relación entre el número de levaduras sembradas y el halo de inhibición del crecimiento (productividad específica). En conclusión, este método resulta una herramienta interesante para ser tenida en cuenta en los protocolos de selección de levaduras killer.

Risk factors associated with the occurrence of Cryptosporidium parvum infection in calves / Fatores de risco associados à ocorrência de infecção por Cryptosporidium parvum em bezerros

Cryptosporidium parvum oocysts were detected in feces of dairy calves raised in Rio de Janeiro State and the risk factors involved in the infection were determined. A hundred calves aging up to 12-month-old from 13 dairy farms were sampled. Polymerase chain reaction was used to detect the presence of oocysts. The zoonotic C. parvum species was detected in 45 percent animals. Statistical risk factors analyses revealed an association between infection and animals raised in technical systems such as the use of milking equipment, milking cooler, and water trough(P<0.05).

Detectaram-se oocistos de Cryptosporidium parvum em fezes de bezerros leiteiros no estado do Rio de Janeiro e analisaram-se os fatores de risco envolvidos na infecção dos animais. Cem bezerros com idades de 0 a 12 meses, provenientes de 13 propriedades rurais, foram amostrados, e suas fezes examinadas pela reação em cadeia da polimerase para a detecção dos oocistos. A espécie zoonótica C. parvum foi detectada em 45 por cento dos animais. As análises estatísticas dos fatores de risco revelaram haver associação entre infecção e animais criados em propriedades tecnificadas, que usam ordenha mecanizada, resfriamento de leite e fazendas que continham reservatórios de água à disposição dos animais (P<0,05).

Interaction between growth differentiation factor 9, insulin-like growth factor I and growth hormone on the in vitro development and survival of goat preantral follicles

The objective of this study was to determine the effects of GDF-9, IGF-I, and GH alone or combined on preantral follicle survival, activation and development after 1 and 7 days of in vitro culture. Either fresh (non-cultured) or cultured ovarian tissue was processed for histological and fluorescence analysis. For all media tested, the percent of normal follicles was greater when compared to minimum essential medium supplemented (MEM+) alone, except when ovarian tissue was cultured with GDF-9/IGF-I or GDF-9/GH (P < 0.05). Fluorescence analysis showed that the percent of viable follicles after 7 days of culture was similar for non-cultured tissue and for all treatments tested. The percent of primordial follicles was reduced (P < 0.05) and there was a significant and concomitant increase in the percent of intermediate and primary follicles in all treatments tested after 7 days of culture when compared to non-cultured tissue. After 7 days of culture, the highest percent of intermediate follicles was observed with IGF-I/GH (61.3 percent), and the highest percent of primary follicles was achieved with IGF-I (57.7 percent). After 7 days of culture in MEM+ containing GDF-9, IGF-I and GH alone or in all associations, a significant increase in follicular diameter was observed when compared to MEM+ alone and non-cultured tissue. In conclusion, GDF-9, IGF-I and GH alone or in combination maintain preantral follicle survival and promote primordial follicle activation. Nevertheless, the data showed that IGF-I/GH and IGF-I alone are efficient in promoting the transition from primordial to intermediate follicles and from intermediate to primary follicles, respectively.

Spoilage yeasts in Patagonian winemaking: molecular and physiological features of Pichia guilliermondii indigenous isolates / Levaduras contaminantes en vinos patagónicos: características moleculares y fisiológicas de los aislamientos indígenas de Picchia guilliermondii

Yeasts belonging to the genus Dekkera/Brettanomyces, especially the species Dekkera bruxellensis, have long been associated with the production of volatile phenols responsible for off-flavour in wines. According to recent reports, the species Pichia guilliermondii could also produce these compounds at the initial stages of fermentation. Based on the abundance of P. guilliermondii in Patagonian winemaking, we decided to study the relevance of indigenous isolates belonging to this species as wine spoilage yeast. Twenty-three indigenous isolates obtained from grape surfaces and red wine musts were analyzed in their capacity to produce volatile phenols on grape must. The relationship between molecular Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) and physiological (killer biotype) patterns detected in indigenous populations of P. guilliermondii and volatile phenol production was also evaluated. Different production levels of 4-ethylphenol, 4-vinylguaiacol and 4-ethylguaiacol were detected among the isolates; however, the values were always lower than those produced by the D. bruxellensis reference strain in the same conditions. High levels of 4-vinylphenol were detected among P. guilliermondii indigenous isolates. The combined use of RAPD and killer biotype allowed us to identify the isolates producing the highest volatile phenol levels.

Las levaduras del género Dekkera/Brettanomyces, sobre todo la especie Dekkera bruxellensis, siempre han sido asociadas con la producción de fenoles volátiles responsables de aromas desagradables en los vinos. Recientemente, se ha demostrado que la especie Pichia guilliermondii también es capaz de producir estos compuestos, particularmente durante las etapas iniciales de la fermentación. Dada la abundancia de P. guilliermondii en las bodegas de la Patagonia, se decidió evaluar la importancia de algunos aislamientos indígenas de esta especie como levaduras alterantes de vinos regionales. Se evaluó la capacidad de producir fenoles volátiles en ensayos sobre mosto de 23 aislamientos de P. guilliermondii provenientes de superficie de uvas y de mostos de fermentación de vinos tintos. Asimismo, se analizó la relación entre los patrones moleculares (RAPD) y fisiológicos (biotipo killer) de estos aislamientos y la producción de fenoles volátiles. Se detectaron diferentes niveles de producción de 4-etilfenol, 4-vinilguayacol y 4-etilguayacol entre los aislamientos de P. guilliermondii analizados; sin embargo, los valores obtenidos fueron en todos los casos inferiores a los producidos por D. bruxellensis cepa de referencia en las mismas condiciones. En general, se detectaron altos niveles de 4-vinilfenol en los mostos fermentados con los aislamientos indígenas de P. guilliermondii. El uso combinado de RAPD-PCR y el biotipo killer permitió identificar los aislamientos que producen los niveles más altos de fenoles volátiles.

Trophic position of bottom-feeding fish in the Upper Paraná River floodplain / Posição trófica de peixes exploradores de fundo na planície de inundação do Alto Rio Paraná

The δ15N composition of bottom-feeding fish (iliophagous = Apareiodon affinis, Cyphocharax nagelii, Prochilodus lineatus, Steindachnerina brevipinna and S. insculpta; detritivorous = Loricariichthys platymetopon and Liposarcus anisitsi; benthophagous = Satanoperca pappaterra and Hoplosternum littorale) and their primary food sources were investigated in the upper Paraná River floodplain during rainy seasons in different environments (lotic and lentic). Two hypotheses were tested: i) that the trophic position and isotopic values of the investigated organisms (fish and food resources) vary spatially; and ii) that trophic position and isotopic compositions differ among iliophagous, detritivorous and benthophagous fish. C4 macrophytes, periphyton and phytoplankton were isotopically different in sites analyzed. Significant isotopic differences occurred in the species of each trophic category. Spatial differences were observed in the isotopic composition of P. lineatus and L. platymetopon, whose values were more enriched in the Paraná River and Pau Véio Lake. Significant spatial differences in trophic position were observed for L. platymetopon and H. littorale, which presented the highest values in the Paraná and Baía rivers, respectively. Trophic positions were significantly different among the species that composed each trophic category. These findings demonstrate that in energy-flow studies in detrital food chains generalizations concerning the grouping of fish into trophic categories and/or habitats should only be carried out after careful investigations of the local/specific trophic dynamics of the organisms.

A composição de δ15N de peixes exploradores de fundo (iliófagos = Apareiodon affinis, Cyphocharax nagelii, Prochilodus lineatus, Steindachnerina brevipinna e S. insculpta; detritívoros = Loricariichthys platymetopon e Liposarcus anisitsi; e bentófagos = Satanoperca pappaterra e Hoplosternum littorale) e suas fontes alimentares foram investigadas na planície de inundação do alto rio Paraná durante a estação de chuvas em ambientes lóticos e lênticos. Duas hipóteses foram testadas: i) que a posição trófica e os valores isotópicos dos organismos investigados (peixes e fontes alimentares) variam espacialmente; e ii) que a posição trófica e a composição isotópica diferem entre os peixes iliófagos, detritívoros e bentófagos. Macrofitas C4, perifíton e fitoplâncton foram isotopicamente diferentes entre os locais analisados. Diferenças isotópicas ocorreram entre as espécies de cada categoria trófica. Diferenças espaciais foram observadas na composição isotópica de P. lineatus e L. platymetopon, as quais tiveram valores mais enriquecidos no rio Paraná e ressaco do Pau Véio. Diferenças espaciais significativas nas posições tróficas foram verificadas para L. platymetopon e H. littorale, as quais apresentaram os maiores valores nos rios Paraná e Baía, respectivamente. As posições tróficas foram significativamente diferentes entre as espécies que compuseram cada categoria trófica. Estes resultados demonstram que em estudos de fluxo de energia em cadeias alimentares detritais generalizações a respeito do agrupamento de peixes em categorias tróficas e/ ou habitats devem ser conduzidos somente após investigações criteriosas da dinâmica trófica local/ específica dos organismos.

Occurrence, distribution and abundance of Halobates micans Eschscholtz, 1822 (Heteroptera, Gerridae) along the southeastern Brazilian coast / Ocorrência, distribuição e abundância de Halobates micans Eschscholtz, 1822 (Heteroptera, Gerridae) na costa sudeste do Brasil

Data collected during an oceanographic cruise along the southeastern Brazilian coast from Cape Frio (22° 58' S) and Paraná (27° 50' S) in March 1982 showed that the marine insect Halobates micans occurred along the Southeastern Brazilian Bight, but in lower abundance in low-temperature areas due to the intrusion and upwelling of South Atlantic Central Water, and in low-salinity areas in Coastal Water. Insect capture was higher at night and in the oligotrophic Tropical Water. The number of nymphs and adult females was higher, probably because of an active breeding season during the austral summer. Adult sex ratio was 1.3:1.0 (F:M). Floating gas vesicles of benthic Sargassum spp. and petroleum lumps were used by females for egg-laying.

Dados coletados em um cruzeiro oceanográfico ao longo da costa sudeste do Brasil, entre o cabo Frio (22° 58' S) e o Paraná (27° 50' S), em março de 1982, mostram que o inseto marinho Halobates micans ocorreu no embaiamento sudeste do Brasil, em baixa abundância em locais de baixas temperaturas superficiais, devido à penetração e ressurgência da Água Central do Atlântico Sul, e em locais com salinidade mais baixa devido à presença da Água Costeira. A captura do inseto foi maior durante a noite e na Água Tropical oligotrófica. O número de ninfas e fêmeas adultas foi mais alto, provavelmente por um ativo período reprodutivo no verão austral. As proporções sexuais dos adultos foram 1,3:1,0 (F:M). Vesículas flutuantes de Sargassum spp. e grumos de petróleo (pixe) foram usados pelas fêmeas para oviposição.

Sexual dimorphism in the squirrel monkey, Saimiri sciureus (Linnaeus, 1758) and Saimiri ustus (I. Geoffroy, 1844) (Primates, Cebidae) / Dimorfismo sexual em micos-de-cheiro, Saimiri sciureus (Linnaeus, 1758) e Saimiri ustus (I. Geoffroy, 1844) (Primates, Cebidae)

Causes and implications of sexual dimorphism have been studied in several different primates using a variety of morphological characters such as body weight, canine length, coat color and ornamentation. Here we describe a peculiar coat color characteristic in the squirrel monkey that is present only in adult females over five years old and which increases with age. Neither males nor young animals manifest this phenomenon, which is characterized by a spot of black hairs located anteriorly to the external ear (pinna). This characteristic could be used to discriminate adult females of Saimiri sciureus in the wild without the need of capture techniques.

As causas e implicações do dimorfismo sexual têm sido estudadas em diferentes espécies de primatas utilizando uma variedade de características morfológicas tais como peso corporal, comprimento de caninos, coloração do pelo e ornamentação. Este trabalho descreve uma característica peculiar da coloração do pelo em micos-de-cheiro, que está presente somente em fêmeas adultas após cinco anos de idade e que se acentua com a idade. Nem machos nem animais jovens manifestam esse fenômeno, que se caracteriza por uma mancha de pelos pretos localizada anteriormente à orelha. Esta característica poderia ser usada para discriminar fêmeas adultas de Saimiri sciureus na natureza sem necessidade de técnicas de captura.